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HBV DNA与HBVm的检测及临床应用评价
HBV DNA 分子杂交试验是目前诊断乙型肝炎、判断病毒复制和评价患者肝脏病变、预后及药物疗效的重要指标之一，目前国内外已普遍应用于临床。为进一步了解HBV DNA 检测的实用价值及临床意义，我们对5974份血清标本，同时用ELISA 检测HAV IgM、HBsAg、HBsAb 、HBeAg、HBeAb、HBcAb、及应用非放射性斑点杂交技术检测HBV DNA，对检测结果及临床应用作出评价。
材料和方法
一、材料
5974份血清标本来自1994年 1月～12月到我科作甲、乙型肝炎血清标志检测者标本，其中门诊标本4002份，住院标本1021份，体检标本 951份。所有标本均为随机抽样而未作任何选择，在作甲、乙型肝炎血清标志检测的同时，进行HBV DNA分子斑点杂交试验。
二、试剂与方法
㈠、甲乙型肝炎血清标志检测试剂均采用厦门新创科技有限公司提供的ELISA 药盒，按说明书操作。判断结果全部采用华东电子管厂生产的DG3022-A型酶联免疫检测仪自动打印结果。所有检测结果均输入微机 FOXBASE数据库管理系统进行统计。
㈡、HBV DNA 杂交试验：药盒由上海医科大学预防医学研究所提供，按说明书 操作。
结 果
5974份血清标本的HBV DNA 及甲、乙型肝炎血清标志的检测结果如附表。 附表 ５９７４例甲乙型肝炎血清标志检测结果
ＨＢＶ 血清标志 例 HBV DNA HAVIgM
HBs 抗- HBe 抗- 抗- 数 阳性 (％) 阳性 (％)
Ag HBs Ag HBe HBc 数 数
＋ － ＋ － ＋ 1843 1522 82.55 43 2.33
＋ － － ＋ ＋ 1824 99 5.43 69 4.00
＋ － － － ＋ 435 39 8.97 10 2.30
＋ － ＋ － － 36 28 77.78 0 0.00
－ ＋ － － ＋ 562 2 0.36 88 15.66
－ ＋ － － － 210 1 0.48 24 11.43
－ ＋ － ＋ ＋ 309 1 0.32 53 17.15
－ － － ＋ ＋ 169 0 0.00 18 10.65
－ － － － ＋ 349 1 0.29 55 15.76
－ － － － － 237 0 0.00 44 18.57
合计 5974 1693 28.34 404 6.76
一、从附表可见，5974份血清标本的 HBV血清标志阳性者中，其HBV DNA的阳 性率分别是：HBeAg(82.49%)大于HBsAg(40.79%)大于抗HBc(29.94%)大于抗HBe(4 .34%)大于抗HBs(0.37%)。
二、从附表也可见，10种HBV 血清标志模式HBV DNA 阳性率与HAV IgM阳性率约成反比，即如HBV DNA阳性率越高，其HAV IgM的阳性率就越低，反之则越高。
三、从附表还可见，表面抗原阳性的前４种HBV 血清标志模式其急性甲肝合并感染率很低为2.95％(122/4138)，而表面抗原阴性的后６种HBV 血清标志模式的急性甲肝合并感染率却较高为15.36%(282/1836)，两者比较X =13.75 P<0.01 相差极为显著，其原因尚待进一步探讨。
讨 论
一、Berninger 采用密度梯度离心技术发现：HBV DNA 阳性血清其 DNA与Dane氏颗粒具有相同的密度梯度，故HBV DNA阳性即反映有复制完整HBV DNA颗粒存在。而HBsAg又是 HBV核心颗粒的主要结构蛋白之一，其合成受HBV遗传编码所控制。有学者报道当孕妇血清中HBV DNA水平很高时(>80pg/10μl)，虽经采取母婴阻断措施，仍可发生母婴传播。有报道HBV DNA与HBeAg密切相关，认为HBV DNA和HBeAg都是评价乙肝患者的传染性的重要指标。本文的检测结果，82.49％ 的HBeAg阳性血清中检出HBV DNA，符合以上观点。
从上述检测结果可见，如果单凭HBeAg阳性或单凭 HBV DNA 阳性来判断乙型肝炎患者的传染性，将会漏掉15％左右具有传染性乙型肝炎患者。因此我们认为应把HBeAg和 HBV DNA 结合起来，两者只要有一项阳性就应考虑其具有传染性。只有这样才能把乙肝的预防、隔离及治疗工作做彻底。
二、近来有文献指出：在部份HBsAg及抗-HBe 阳性的乙肝患者血清中HBV DNA也阳性。因此认为，抗HBe阳性只能说明病毒复制程度减低，而不能代表复制停止，病情有可能反复。我们在1 824例HBsAg及抗HBe同时阳性的血清中有99例
HBV DNA 阳性，阳性率5.43％也反映以上观点。所以我们认为在判断乙型肝炎的预后，HBV DNA比HBeAg更敏感而特异。当乙肝病毒清标志物检测结果为HBeAg阴转，而抗-HBe阳转还不能乐观，只有在HBeAg与HBV DNA 同时阴转时，病情才可能是较隐定的康复期。因此把HBV DNA列入常规检查，将更能准确、更全面地判断急慢性乙型肝炎的预后。
三、有文献报道，在抗-HBe阳性的患者中，HBV DNA阳性率达10.9％左右。我们在1 302例抗-HBe阳性的血清中查出100例HBV DNA阳性，阳性率为4.34％。从附表还可见：在1 836例HBsAg阴性的血清中查出5例HBV DNA 阳性，阳性率0.27％。这对于筛选献血者具有很大价值。因而我们认为在筛选献血员时，最好能同时检查 HBV DNA，以确保病人用血安全。
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